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基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心．
故答案为：
目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定
基因工程，又称基因拼接技术或DNA重组技术，是一种在分子水平上对遗传物质进行操作和改造的先进生物技术。它利用生物化学、分子生物学、遗传学和信息学等原理和方法，按照人们的需求，对生物的遗传基因进行改造和重新组合，以改变生物的性状、创造新的生物类型和生物产品。
基因工程的基本过程通常包括以下几个步骤：
1.目的基因的获取：首先需要从生物体中分离出目的基因，该基因可以是具有特定功能的基因，也可以是控制特定性状的基因。分离目的基因的方法包括从生物体的基因组中直接分离，或者通过聚合酶链反应（PCR）等技术进行扩增。
2.基因表达载体的构建：为了将目的基因引入受体细胞，需要将其插入到一个特殊的DNA分子（称为表达载体）中。表达载体通常包含一个启动子，一个终止子，以及一个复制原点等元件。启动子是控制基因表达的区域，终止子是终止转录的区域，复制原点则是保证载体在受体细胞中自主复制的序列。
3.受体细胞的选择和准备：为了将目的基因导入受体细胞，需要选择合适的受体细胞。受体细胞可以是细菌、酵母、动物细胞或植物细胞等。在导入基因之前，需要对受体细胞进行预处理，使其处于一种能够接受外源DNA的状态。
4.基因转移：将构建好的表达载体和目的基因导入受体细胞中。导入的方法包括钙磷酸盐转染、电穿孔、显微注射等技术。
5.筛选和鉴定：导入基因后，需要对受体细胞进行筛选和鉴定，以确保导入成功并表达出所需的性状。筛选和鉴定的方法包括抗性筛选、分子检测和生化分析等。
6.基因产物的表达和纯化：如果导入的目的基因在受体细胞中成功表达，需要通过适当的方法将基因产物表达和纯化。表达和纯化的方法取决于基因产物的性质和用途，包括发酵、细胞破碎、离心、层析等技术。
基因工程在医学、农业、工业和环境等领域具有广泛的应用前景。例如，基因工程在医学上可以用于基因治疗，通过导入正常的基因来替代或修复缺陷基因；在农业上，可以通过转基因技术提高作物的抗病性、抗虫性和抗逆性；在工业上，可以利用基因工程生产有价值的生物制品，如药物、酶和工业用蛋白等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复，通过导入降解污染物的基因来提高生物对污染物的降解能力。
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