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在中国,转基因生物新品种在获得安全证书之前需要进行的研发流程包括3到5年的实验研究、1到2年的中间试验、1到2年的环境释放、1到2年的生产性试验。
“基因”为英语“gene”的音译,有“开始”或“生育”的意思,基因是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。
转基因作物就是指利用分子生物学手段,将某些生物的基因转移到其它生物物种上,使其出现原物种不具有的性状或产物,以转基因生物为原料加工生产的食品就是转基因食品,简称GM Food)。世界上第一种转基因食品是1994年投放美国市场的保鲜延熟型西红柿。
农业转基因生物是指利用基因工程技术改变基因组构成,用于农业生产或者农产品加工的动植物、微生物及其产品。通俗一点说,也就是利用基因工程技术把一种生物体内的基因转移到另一种生物体内,以此得到新的物种。这样得到的生物被称为“转基因生物”。
转基因生物用途:
转基因生物具有广泛的应用。它们用于生物和医学研究,药品生产,实验医学杂志(如基因疗法),农业(如金饭碗)。“转基因生物体”是指有针对性的在一个物种的基因中插入另外一个物种的基因。
例如,将一个水母基因中绿色荧光蛋白的编码片段物理连接到哺乳动物的基因中,将确定位置的绿色荧光蛋白编码的蛋白质标记在哺乳动物细胞基因的相同位置上,以得到含有绿色荧光蛋白编码的动物细胞,外在表象就是原来不具有荧光的细胞有了荧光功能。
这种方法是生物学家在许多领域进行研究的有效工具,其中也包括形成其他疾病的真核或原核细胞基本生物学过程的研究。
一、原理
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA
和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,Lentivirus-siRNA
克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。
二、特点
1) 直接包装成为假病毒颗粒,对分裂和非分裂细胞均有感染作用,适合 RNAi 研究和体内实验中难于转染的细胞 (比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞)。?
2) 可以通过简单方式,在短时间内获得稳定表达特定基因的多种细胞株。
3) 可用于基因敲除、基因治疗和转基因动物研究。
4) 无需任何转染试剂,操作简便。
5) 可以根据客户需要制备多种标记。
三、慢病毒包装简要流程:
1) 含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。
2) 慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。
3) 培养 48hrs – 72hrs 左右,收集含有病毒的上清培养液。
4) 病毒的纯化和浓缩。
5) 分装、- 80 ℃保存。
6) 滴度测定目的基因检定,并出具检测报告。
文章来源英格恩博客
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