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(1)已知干扰素的氨基酸序列,则利用人工合成法获取目的基因较简单.目的基因还可以从cDNA文库获取,由于cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA反转录产生,因此cDNA文库只含某种生物的部分基因.
(2)基因表达载体包括标记基因、启动子、终止子、目的基因、复制原点等.
(3)动物细胞培养的条件包括无菌、无毒的环境、营养、适宜的温度和pH、气体环境,提供气体中CO2的主要作用是维持培养液的pH.
(4)目的基因的检测一般利用DNA分子杂交技术检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因.
故答案为:
(1)人工合成法? cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA反转录产生
(2)启动子?终止子?标记基因
(3)无菌、无毒的环境温度和pH?维持培养液的pH
(4)染色体的DNA
果蝇是遗传学实验中常用的材料,研究发现果蝇性别的形成与多种因素有关.例如在果蝇的常染色体上存在一对
(1)用EcoRI酶切出的目的基因和质粒具有相同的黏性末端,如果放在一起加入DNA连接酶,则可出现3种连接结果,即目的基因自身连接形成的连接物,载体自身连接形成的连接物和重组质粒,要通过筛选、纯化才能选出符合要求的DNA.
(2)载体自身形成的连接物能重新形成完整的tetR基因,具有抗四环素的特点,其他连接物中tetR基因被限制性内切酶破坏,不再具有抗四环素的特点;在整个操作过程中,ampR基因保持完整,载体(质粒)自身连接形成的连接物和目的基因-载体连接物(重组质粒)都具有抗青霉素的特性.
(3)RNA聚合酶与相关基因的启动子结合,完成的是转录过程,转录的产物是mRNA.
(4)将含有目的基因的靶DNA片段和载体分别用两个不同的限制性内切酶切割,使两种DNA片段自身的5′和3′黏性末端不同,但二者相同末端又互补,这明显减少靶DNA片段和载体自身环化与串连,使外源DNA片段能正确插入载体启动子下游.在本题中目的基因两端有EcoRI酶切点和BamHI酶切点,在质粒载体上也有这两种酶的切点,所以可以用这两种酶切出非同源性互补末端来阻止其他连接.
(5)由以上分析可知:a是转录过程,b是逆转录过程.逆转录过程需以mRNA为模板,脱氧核苷酸为原料合成DNA,该过程还需要的条件是ATP、逆转录酶、DNA聚合酶等.
(6)获取目的基因的方法有:依据蛋白质的氨基酸序列推测出DNA序列后人工合成、从基因文库中获取.
(7)在基因工程的检测目的基因是否转录形成mRNA,用的分子杂交技术;检测目的基因是否翻译形成蛋白质,用的是抗原-抗体杂交法.
故答案:(1)3
(2)目的基因-载体连接物、载体-载体连接物?
(3)mRNA?
(4)EcoRI和BamHI?
(5)转录 逆转录? 脱氧核苷酸? 逆转录酶
(6)限制酶切法(依据蛋白质的氨基酸序列推测出DN序列后人工合成、从基因文库中获取)
(7)分子杂交 抗原-抗体杂交反应
(1)XXY的果蝇多了一条性染色体X,为染色体数目变异,可以通过非整倍体染色体组型或染色体核型来构成图象,从而对该生物染色体数目和形态特征全貌加以诊断.
(2)一只白眼雌果蝇(XwXw)与一只红眼雄果蝇(XWY)杂交,后代雄性应该亲本是白眼XwY,雌性应该全部是红眼XWXw,但是后代却出现了白眼雌果蝇,则该白眼雌果蝇可能基因型可能是XwXw、XwXwY.
①若该白眼雌果蝇的基因型为 XwXw,则形成原因为父本形成精子时发生了基因突变;
②若该白眼雌果蝇的基因型为 XwXwY,则形成原因为母本形成卵细胞时发生同源染色体未分离或着丝粒未分离.
③后代只出现1只白眼雌蝇说明变异具有稀有性的特点.
(3)两只表现型正常且相同的果蝇杂交,F1果蝇中有202只雌蝇和98只雄蝇,即雌果蝇:雄果蝇=2:1.根据题意已经排除了上述两种可能的原因,则该杂交结果可能是由一对位于X染色体上等位基因A、a引起的,雄性隐性个体致死,遗传图解如下:
(4)基因工程的核心步骤是重组DNA分子的构建,其第一个步骤是获取目的基因,若对荧光基因核苷酸序列未知则只能从基因文库中获取目的基因.
故答案是:
(1)非整倍体染色体组型(染色体核型)
(2)①XwXw 基因突变? ②XwXwY
同源染色体未分离或着丝粒未分离
③稀有性
(3)X
(4)从基因文库中获取? 重组DNA分子构建
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