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考点： 基因工程的原理及技术 专题： 分析： 基因工程中要对目的基因进行切割、改造、修饰和拼接，然后导入受体细胞，使重组DNA分子在细胞中表达．要实现这一精确的操作过程至少需要三种工具：准确切割DNA的“手术刀”--限制性核酸内切酶，将DNA片段连接起来的“缝合针”--DNA连接酶，将体外重组好的DNA导入受体细胞的“运输工具”--基因的载体． A、DNA连接酶能够将限制酶切割的末端连接，是基因工程的“缝合针”，A错误；B、DNA聚合酶一般用于合成DNA，不属于基因工程的操作工具，B错误；C、蛋白质水解酶用于水解蛋白质，不属于基因工程的操作工具，C错误；D、限制性核酸内切酶内特异性识别特定的核苷酸系列，在基因工程能够在特定的核苷酸序列出切割质粒和目的基因，故称为基因工程的“剪刀”，D正确．故选：D． 点评： 本题考查基因工程相关知识，考生要能够识记基因工程三种工具的作用，能够根据作用的特点对应“手术刀”、“缝合针”和“运输工具”，属于简单题．
思路：问题就是依照实际需要提出的 考点在于基因工程的各项操作 以及整体流程
目的基因的获取 2.目的基因与载体连接 3.转化 4.筛选鉴定
我们要做的就是把事情办成 顺利完成整个流程操作
答案：
答出表达过程 转录 翻译 尽量详细 知道什么就答什么
5‘CGCTCGAGATGTCCGAAGAAATCATTTC 3’ 5‘端CG是保护碱基限制性内切酶识别切割必须要有保护碱基 不同酶需要保护碱基个数不同 CTCGAG是Xho1的酶切位点 酶切位点选择很随意 只要在MCS（Mutiple Cloning Site多克隆酶切位点）里面 基因里面无此位点（防止将基因切断）注意基因方向即可 ATG后面是与模板结合的序列 注意末端尽量不要为3的倍数
体系就是反应条件 需要酶 引物 dNTP 缓冲液
ddH2O40微升
10*buffer（缓冲液，里面有Mg2+ 什么的 保证酶的活性 调整PH）5微升 dNTP? 1微升 引物1? 1微升 引物2? 1微升 马铃薯基因组（模板）1微升耐高温高保真DNA聚合酶（或者Taq DNA聚合酶） 1微升
这个之前说过了 给出操作步骤即可 没必要太具体
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