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利用基因工程技术可以将外源基因转入大肠杆菌中。
过程:第一步:用限制性核酸内切酶(简称内切酶)切割所需要的外源基因(也称为目的基因),并提取出来。
第二步:将大肠杆菌里的质粒提取出来,并用内切酶切割出切割点,随后将目的基因+DNA连接酶连接上去(就像你缝衣服一样)。
第三步:把质粒导入大肠杆菌中,并在一段时间过后随机提取出质粒检测,看外源基因是否已经开始在大肠杆菌中复制
我记得不是太清楚,详情请见高中生物选修 ——现代生物基因技术
大肠杆菌(E. coli)在植物基因工程中的主要作用?详细一点,谢谢!
为什么选大肠杆菌进行基因工程的实验
比较了不同方法制备的大肠杆菌感受态细胞的转化效率,并优化了质粒DNA转化感受态细胞体系。结果表明:高效法制备的感受态细胞转化效率极显著高于普通法制备感受态细胞的转化效率,其效率提高了966.1%,而高效法感受态细胞转化效率与商品化的感受态细胞转化效率差异不显著。-80℃超低温长期保存时,相比较于15%甘油,以7%DMSO为冻存保护剂保存的感受态细胞其转化效率达到1.1×107,较15%甘油冻存保护剂保存的转化效率提高了69%。温浴5 min,冰浴10 min时,其转化效率最高,达到4.95×107。应用高效法制备的感受态细胞转化不同大小质粒的效率极显著高于普通大肠杆菌感受态细胞,其转化效率较普通大肠杆菌感受态细胞的提高了550%,而转化时间缩短至普通大肠杆菌感受态细胞的12.5%,仅为15min。
大肠杆菌里取出了两种不同的质粒,它们各自具有一个抗药的基因。科恩把两种质粒上不同的抗药基因"裁剪"下来,再把这两种基因"拼接"在同一个质粒中。当这种杂合质粒进入大肠杆菌体后,这些大肠杆菌就能抵抗两种药物,而且这种大肠杆菌的后代都具备双重抗菌性
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