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抗性基因工程育种与抗逆基因工程育种
抗性基因工程育种
基因工程的发展为培育抗病虫的作物提供了新的手段,从而开辟了植物抗病虫育种的新时代。抗病毒基因工程育种主要是将病毒外壳蛋白基因移植到农作物中,使农作物能抵抗病毒感染,培育出抗病毒番茄、抗病毒烟草、抗病毒黄瓜等作物新品种。
在抗真菌病害方面,中国农业科学院生物技术研究中心与作物科学研究所合作,将几丁质酶和葡聚糖酶双价基因导入小麦,育成双价抗病转基因小麦,抗赤霉病、纹枯病和根腐病等真菌性病害。抗植物虫害的基因有多种,目前经常使用的主要有3种:
① 从微生物苏云金杆菌分离出的苏云金杆菌杀虫结晶蛋白基因,简称B2基因。
② 从植物中分离出的昆虫蛋白酶抑制剂,其中应用最广泛的是豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(~T1)。
③ 植物凝集素基因(1ectingene)。这些转基因作物能减少杀虫剂和农药的用量,降低杀虫剂和农药及其残留物对食物链、水体造成的污染,从而有利于保护生态环境。
抗逆基因工程育种
基因工程在抗旱、抗盐碱育种上的应用为克服干旱提供了新思路。美国斯坦福大学把仙人掌基因导入小麦、大豆等作物,育成抗旱、抗逆的新品种。我国在抗逆基因的分离、克隆和转化等方面的研究也取得了新进展,已克隆了耐盐碱相关基因,通过遗传转化已获得了耐盐烟草、水稻、番茄、草莓等。
⑴将抗原(一般是灭活的甲流病毒)注射入小鼠体内,从小鼠脾脏中获取能产生对应抗体的B淋巴细胞。
⑵将获得的B细胞与小鼠骨髓瘤细胞在灭活病毒或聚乙二醇的诱导下融合,筛选出杂交瘤细胞(融合过程中产生三种融合细胞:①B细胞+B细胞,②瘤细胞+瘤细胞,③B细胞+瘤细胞 即所需的杂交瘤细胞,具有B细胞分泌特异性抗体的能力,以及瘤细胞无限增殖的本领)。
⑶培养杂交瘤细胞,挑选出能产生所需抗体的细胞群,继续培养至足够数量,注射到小鼠腹腔内增殖或在体外大规模培养。得到大量单克隆抗体。
注:制备单克隆抗体过程用到细胞融合技术和动物细胞体外培养技术(属于细胞工程),而不涉及基因工程,基因工程是将外源基因通过质粒等表达载体导入其他生物(受精卵),使之在其体内得以表达并遗传的技术。
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