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反转录 PCR扩增
(1)从人体细胞内提取胰岛素基因转录的mRNA——→胰岛素基因(cDNA)——→获取大量胰岛素
基因(cDNA)——→
人工改造
(2)从大肠杆菌细胞内获取质粒——→带有四环素抗性基因的质粒——→
(3)把上述(1)(2)的目的基因和质粒用EcoR1限制酶切割后用E.coliDNA连接酶连接得到基因表达载体
(4)用CaCl2溶液处理酵母菌使其转化为感受态细胞
(5)将(3)(4)的基因表达载体与酵母菌细胞放入缓冲液中混合，提供适宜温度完成转化
(6)一段时间后把酵母菌细胞转移到含有四环素的培养基上进行筛选
(7)把筛选后的酵母菌放到含有葡萄糖的营养液里在通氧的条件下大量繁殖
(8)破碎酵母菌细胞提取胰岛素（或者从培养液中直接提取胰岛素，这个胰岛素到底能不能被酵母菌分泌我也不知道）。
知识所限只能答到这种程度，没有真的做过这个实验，纯理论性回答。仅供参考~
基因工程基本操作流程如图，请据图分析回答：（1）图中A是______；形成重组DNA分子的操作步骤叫做______
1、抽取尖锐湿疣、疱疹患者适量外周血；
2、分离得到单个核细胞；
3、分别加入不同的诱导因子；
4、促使单核细胞转变为DC；
5、加入特异性抗原或特殊抗体；
6、DC将HPV、HSV特异性抗原摄取并加工，同时自身由不成熟走向成熟；
7、将培养好的细胞回输给患者；
8、免疫细胞接受HPV、HSV抗原信息,分化为特异性杀伤细胞；
9、杀伤细胞以非溶胞机制抑制和杀灭胞内病毒；
10、具有能识别和杀伤HPV、HSV功能的免疫细胞对尖锐湿疣、生殖器疱疹病毒进行彻底有效的杀灭；
11、彻底恢复机体免疫系统，各项指标达到治愈标准。
（1）分析图解，基因工程中需要将目的基因和运载体构建成重组质粒，因此图中A是运载体；形成重组DNA分子的操作步骤叫做目的基因与运载体连接．
（2）在基因工程中，过程②表示基因表达载体的构建，需要在限制性核酸内切酶的作用下才能完成剪切过程，剪切的结果是形成黏性末端，需要DNA连接酶的作用下才能完成拼接过程．
（3）利用基因工程技术可以培育抗虫棉，相比诱变育种和杂交育种，具有目的性强、克服远缘杂交不亲和的障碍和育种周期短等突出的优点．
（4）目的基因可以在受体细胞中得到表达，是因为不同生物共用一套遗传密码．
故答案为：
（1）运载体目的基因与运载体连接
（2）限制性核酸内切酶?黏性末端?DNA连接酶
（3）目的性强?克服远缘杂交不亲和的障碍（育种周期短）
（4）共用一套遗传密码
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